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    網站首頁技術支持 ◇ 免疫親和柱有著怎樣的使用要點?
    免疫親和柱有著怎樣的使用要點?
  • 發布日期:2022-01-14      信息來源:本站      瀏覽次數:100
    •    免疫親和柱的原理:

        本實驗測定的基礎是抗原抗體間的特異性反應。單克隆抗體被偶聯在柱內凝膠上,樣品中的經過提取、過濾、稀釋;然后將樣品提取液通過鍵合有抗體的親和柱。
      此時,鍵合在親和柱中的抗體上。之后用蒸餾水將親合柱上的雜質除去。用甲醇洗脫親和柱,將從抗體上分離下來。將過濾的甲醇溶液注入熒光計或HPLC進行測定。
       
        特點:
        1、采用定向偶聯技術,抗體載量大,有效柱容量高。所有親和柱產品柱容量均滿足國標對于商品化柱容量的要求;
       
        2、凝膠粒徑均勻,過柱自然流速即可,不需額外加壓;
       
        3、采用抗體定向偶聯技術,樣本回收率高;
       
        4、操作簡便,可洗脫后直接進樣,無需氮吹。
       

      免疫親和柱

       

        免疫親和柱的使用要點:
        1、上柱的樣品溶液應該保持酸堿中性、無懸浮物、甲醇濃度不宜過高;
       
        2、若樣品為復雜樣品,例如高蛋白、高油脂、酸性樣品,可以將提取液分兩次提取樣品,可以提高提取效果;
       
        3、樣品過柱及甲醇洗脫速度要慢且均勻,約每秒1-2滴;
       
        4、抗原抗體發生反應的最佳溫度是在25℃左右,實驗需要的環境溫度最好是室溫24℃-28℃,太高或太低的溫度都會對回收率有一定的影響。在使用前需要恢復至室溫再進行實驗;
       
        5、不要在無水狀態下,瓊脂容易干燥萎縮,影響質量;
       
        6、儲存條件為4℃-8℃。切記0℃以下的低溫,因為緩沖液凍結,會嚴重影響親和柱內的物理結構,對質量影響很大;
       
        7、洗脫一般選擇試劑甲醇,為增強洗脫效果可加大甲醇體積;
       
        8、樣液免疫凈化后,洗脫液過0.45um或更小孔徑濾膜效果更好。

    北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)

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